Letter 生細胞膜タンパク質の可逆的な部位選択的標識 2004年4月1日 Nature Biotechnology 22, 4 doi: 10.1038/nbt954 化学的および生物学的標識は、細胞の生化学的ネットワークのタンパク質機能解析に不可欠である。特に蛍光プローブを用いると、生細胞内タンパク質の分子間相互作用、移動性および高次構造変化を高い時間的および空間的分解能で検出することができる。本論文では、多様な特性を付加することができる低分子プローブを用いてタンパク質をin vivoで選択的、可逆的かつ迅速に（秒単位で）標識するための一般法を紹介する。このプローブは発色団および金属イオンキレート剤のニトリロ三酢酸（NTA）部分からなり、NTAが対象タンパク質中の改変オリゴヒスチジン配列に可逆的かつ特異的に結合する。この方法の可能性は、代表的リガンド依存性イオンチャネルおよびGタンパク質結合受容体にそれぞれポリヒスチジン配列を導入し、これにNTA−発色団複合体を結合させることによって示された。イオンチャネル型の5HT3セロトニン受容体に関して蛍光測定を行い、in vivoでのプローブ−受容体相互作用を解析することによって、受容体の構造および細胞膜上分布に関する情報が得られた。 Full text PDF 目次へ戻る
