Article

プロテアーゼ切断部位の特定を目的とするデータベース検索が可能なプロテオーム由来のペプチドライブラリー

Nature Biotechnology 26, 6 doi: 10.1038/nbt1408

本論文では、配列特異的なタンパク質相互作用の解析を目的とするデータベース検索が可能なヒトプロテオーム由来のペプチドライブラリーを紹介する。エンドプロテアーゼの切断部位の特定には、一級アミンを保護してそのライブラリーのペプチドを用い、切断される結合のN末側（ノンプライムP）およびC末側（プライムP′）の配列選択性を同時に明らかにした。プライム側の切断生成物はビオチンで標識して単離し、タンデム質量分析法で同定する一方、対応するノンプライム側の配列は、バイオインフォマティクスを用いてヒトプロテオームデータベースから導いた。数百から1000を超えるペプチド断片の一つひとつを同定することにより、共通のプロテアーゼ切断部位とサブサイトの協同性が、P6からP6′まで容易に明らかにされた。特異性の高いGluCプロテアーゼでは、特定した切断部位558カ所の95%超が標準的な選択性を示した。特異性の低いマトリックスメタロプロテイナーゼ2に関しては、1,200を超えるペプチド切断部位が見出された。HIVプロテアーゼ1、カスパーゼ3、カスパーゼ7、カテプシンKおよびG、エラスターゼ、それにトロンビンの解析から、この方法が全機構クラスのエンドプロテアーゼに広く応用可能であることが示された。

目次へ戻る

ネイチャーの人気コンテンツ

  1. 遠方のサブミリ波で明るい銀河のバルジの形成
  2. 複数の量子プロセッサーを古典的に接続した量子コンピューター
  3. 二次元ヒルベルト空間の断片化
  4. 鳥のように飛び立てるロボット
  5. 非常に似通った高分子を互いに分離する
  6. 骨移植用の新たな競合材料
  7. 遷移金属触媒を用いない求電子剤カップリング
  8. 熱帯林は大きな自然再生能力を秘めている
  9. ジュラ紀までさかのぼったオタマジャクシの起源
  10. C4光合成を可能にした分子進化
advertisement
プライバシーマーク制度