循環置換・PAM改変Cas9バリアントが塩基エディターの標的範囲を広げる

塩基編集では、標的配列がCas9ドメインのプロトスペーサー隣接モチーフ（PAM）要件を満たし、標的ヌクレオチドが塩基エディターの編集枠内に位置することが必要である。塩基エディターの標的範囲を広げるため、我々は、非NGGのPAMに適合するSpCas9バリアントを用いる最適化アデニン塩基エディター（ABEmaxバリアント）を6種類作製した。プロトスペーサー内で改変される標的塩基の範囲を広げるために、循環置換Cas9バリアントを用いて、編集枠が4～5ヌクレオチド程度から8～9ヌクレオチド程度にまで広がり副産物生成が抑制された、シトシン塩基エディターとアデニン塩基エディターを4種類ずつ得た。この塩基エディターのセットは、シトシン塩基編集およびアデニン塩基編集の標的範囲を改善する。