イネの選択的で効率的な塩基配列挿入および置換

CRISPR–Cas9法は、ランダムな挿入と欠失、大規模な欠失、短い塩基配列の選択的な挿入または置換、および正確な塩基の改変を植物に導入するために利用されてきた。しかし、作物の機能ゲノミクス研究や形質改良に必要とされる長い塩基配列や遺伝子の選択的な挿入または置換を行うための汎用的な方法はほとんどなく、概して選択マーカーの使用に依存している。我々は、哺乳類細胞で開発された方法に基づき、化学修飾されたドナーDNAとCRISPR–Cas9を用いて、エンハンサーとプロモーターを含む最大2049塩基対（bp）の配列を25％の効率でイネゲノムに挿入した。我々はまた、相同組換え修復、化学修飾されたドナーDNA、および標的部位の縦列反復配列の存在に依拠した遺伝子置換法についても報告する。この方法では、最大130 bpの塩基配列を6.1％の効率で置換することができた。