グリコシラーゼ塩基エディターがCからAおよびCからGへの塩基変換を可能にする

従来の塩基エディター（BE）は、塩基のトランジション（CからTおよびAからG）しか触媒せず、塩基のトランスバージョンを行うことができない。本論文では、大腸菌でCからAへのトランスバージョン、哺乳類細胞でCからGへのトランスバージョンを生じるBEを紹介する。このグリコシラーゼ塩基エディター（GBE）は、Cas9ニッカーゼ、シチジンデアミナーゼ、ウラシルDNAグリコシラーゼ（Ung）によって構成される。Ungは、デアミナーゼが生成するU塩基を除去し、DNA修復過程が開始される脱プリン／脱ピリミジン（AP）部位を形成する。我々は大腸菌において、活性化誘導シチジンデアミナーゼ（AID）を使用してAID-nCas9-Ungを構築し、これが93.8％±4.8％という平均編集特異度および87.2％±6.9％という平均編集効率でCからAへと変換することを示した。また我々は、哺乳類細胞での使用に向けて、AIDをラットのAPOBEC1で置換した（APOBEC-nCas9-Ung）。APOBEC-nCas9-Ungを内在部位30か所で検討すると、プロトスペーサーの6番目の位置で、29.7％～92.2％という高い編集特異度および5.3％～53.0％という編集効率でCからGへの変換が認められた。APOBEC-nCas9-Ungは、従来のアデニンBE（ABE）とシチジンBE（CBE）を補完するものであり、疾患を引き起こすG/C変異の標的化への使用が考えられる。