CRISPRiを用いて複雑なクローンライブラリーから目的の塩基配列をハイスループットで取得する

大規模なクローンライブラリーに含まれるメタゲノムDNAを捕捉することにより、培養に依存する方法では不可能な微生物多様性研究が可能になる。本研究では、ヌクレアーゼ欠損Cas9を利用して、複雑なライブラリーからの目的クローンの取得に使用可能なCCIC法（CRISPR counter-selection interruption circuit）を構築した。最新の塩基配列解読法をCCICクローニングと組み合わせることで、自然生態系に存在する遺伝的多様性が素早く物理的に取り扱えるようになった。