変調励起による単一蛍光分子のナノメートルの軸方向位置決定

距離測定は、一般的にロックイン法に基づく位相検出によって行われている。しかし、超解像蛍光顕微鏡法では、依然として、全く異なる戦略を通した軸方向位置決定の取り組みが行われている。今回我々は、取得時間、発光体密度、横方向位置決定精度を損なうことなく、照明変調法によってナノメートルの軸方向位置決定精度を達成できることを示す。励起パターンは、傾斜干渉縞をシフトさせることによって得られる。分子の位置決定は、各フルオロフォア応答と参照変調励起パターンの相対位相を測定することによって行った。我々は、単一発光体の短い発光持続時間に対応できる高速復調方式を設計した。この変調局在顕微鏡法によって、全視野および軸方向の捕捉範囲全体にわたって6.8 nmという代表的な位置決定精度が得られた。さらに、干渉パターンが光学収差に対してロバストであり、軸方向位置決定精度がほぼ均一なので、深さ数マイクロメートルまでの生体試料の画像化が可能になる。